Was ist hochleistungsflüssigkeitschromatographie?

Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist eine analytische Methode, die zur Trennung, Identifizierung und Quantifizierung von Substanzen in einer Probe verwendet wird. Sie basiert auf der Interaktion der zu trennenden Analyten mit einer stationären Phase und einer mobilen Phase.

Die HPLC-Analyse umfasst eine breite Palette von Anwendungen in verschiedenen Bereichen wie der pharmazeutischen, biotechnologischen, chemischen, lebensmitteltechnologischen und Umweltanalytik. Sie wird häufig zur Bestimmung von Verunreinigungen, Wirkstoffen, Trennung von Mischungen, Identifizierung von Substanzen und zur Überwachung von Prozessen eingesetzt.

Der Aufbau eines HPLC-Systems umfasst eine mobile Phase (flüssige Substanz oder Lösungsmittel), eine Kolonne (stationäre Phase) und eine Detektionseinheit (zur Erkennung der getrennten Substanzen). Die mobile Phase wird mit Hilfe einer Pumpe durch die Kolonne geleitet, wobei die Analyten basierend auf ihren physikalischen und chemischen Eigenschaften separiert werden.

Die Trennung erfolgt aufgrund der unterschiedlichen Retentionszeiten der Analyten in der stationären Phase. Diese Retentionszeit hängt von Faktoren wie der Polarität der Analyten, der Polarität der stationären Phase, dem pH-Wert der mobilen Phase und dem Flussratenprofil ab.

Die Detektionseinheit in einem HPLC-System kann verschiedene Techniken wie UV-Vis-Spektroskopie, Fluoreszenzdetektion, Massenspektrometrie oder elektrochemische Detektion umfassen. Diese Techniken ermöglichen die Identifizierung und quantitative Bestimmung der getrennten Analyten.

HPLC bietet eine hohe Trennleistung, hohe Empfindlichkeit, hohe Auflösung und Vielseitigkeit in Bezug auf die Analysen. Es gibt verschiedene Arten von HPLC-Techniken wie die normalphasige HPLC (NP-HPLC) und die umgekehrte Phasenhochleistungsflüssigkeitschromatographie (RP-HPLC). Jede Technik hat ihre eigenen Anwendungsbereiche und Bedingungen.

Insgesamt spielt die HPLC eine wichtige Rolle in der Analytik und ist zu einem unverzichtbaren Werkzeug in vielen wissenschaftlichen Bereichen geworden.