Was ist agarose-gelelektrophorese?

Agarose-Gelelektrophorese ist eine Methode, die in der Molekularbiologie verwendet wird, um DNA, RNA oder Proteine nach ihrer Größe zu trennen. Es ist eine weit verbreitete Technik, um Nukleinsäuren zu analysieren, einschließlich der Bestimmung ihrer Größe, Reinheit und Konzentration.

Agarose ist eine Art von Polysaccharid, das aus Meeresalgen gewonnen wird und sich leicht in Wasser auflöst, um eine Gelmatrix zu bilden. Diese Gelmatrix wird in eine horizontale oder vertikale Elektrophoresekammer gegossen, die mit Puffer gefüllt ist. Die DNA-, RNA- oder Proteinproben werden in Vertiefungen (Wells) im Gel geladen und dann einem elektrischen Strom ausgesetzt.

Während der Elektrophorese wandern die geladenen Moleküle durch das Gel aufgrund des elektrischen Feldes, das im Gel erzeugt wird. Kleinere Moleküle bewegen sich schneller als größere Moleküle, daher trennen sie sich basierend auf ihrer Größe durch die Gelmatrix.

Nach der Elektrophorese können die Moleküle im Gel sichtbar gemacht werden, indem Farbstoffe, wie Ethidiumbromid, verwendet werden. Unter UV-Licht fluoresziert das gefärbte DNA- oder RNA-Fragment und kann fotografisch dokumentiert werden. Alternativ können die Moleküle auch mit spezifischen Sonden markiert werden, um bestimmte Sequenzen zu identifizieren.

Agarose-Gelelektrophorese ist eine wichtige Methode in verschiedenen Bereichen der Biologie, einschließlich der Genetik, Genomik und Proteomik. Es wird häufig verwendet, um DNA-Fragmente für weitere Experimente zu isolieren, PCR-Produkte zu analysieren, Restriktionsverdaulichkeiten zu überprüfen, Genotypisierungen durchzuführen und die Reinheit von Nukleinsäureproben zu überprüfen.

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